بررسی پاسخ آنتی بادی های منو کلونال بر علیه آنتروتوکسین اپسیلون کلوستریدیوم پرفرینجنس به روش کشت ماکروتکنیک

کلوستریدیا پرفرینجنس باکتری بی هوازی است که با تر شح توکسین اپسیلون منجر به بیماری کشنده آنتروتوکسیمی در دام می شود ، در این مطالعه اثر سیتوتوکسیسیته دو منو کلونال آنتی بادی خنثی کننده،4D7 و5B7 بر علیه توکسین اپسیلون بررسی شد. بدین منظور باکتری کلوستریدیا پرفرینجنس بر روی سلول تهیه شده از کلیه سگ( Madin, MDCK (Derby Canine Kidney کشت داده شد. و سلول ها بوسیله 7 استینو دی آمین رنگ آمیزی شدند و دو منوکلونال به آن افزوده و در انکوباتور قرار داده شد. دو آنتی بادی منو کلونال 4D7و 5B7از تشکیل منافذ در غشای سلولی MDCK ممانعت نمودند. به کمک آنالیز توکسین های موتانت و دو آزمون الایزای رقابتی و آرایه پپتیدی، به کمک آنتی بادی منو کلونال 4D7آمینو اسیدهای 145،134 تشخیص داده شد. و نیز نشان داده شد که آنتی بادی های منو کلونال خنثی کننده سبب تشخیص اپی توپ دیگری هم در نزدیکی این ناحیه می باشند این ناحیه از آمینو اسیدهای145،134 تشکیل شده است که حلقه مولکول پروتئین آمفی پاتیک الحاقی با غشای توکسین هم پوشانی دارند تعیین هویت و مشخص کردن اپی توپ های شناخته شده توسط آنتی بادی های خنثی کننده نخستین گام مهم در روند توسعه درمان عوامل بیماریزا و نیز قابل استفاده در مواجهه با اثر توکسین اپسیلون کلوستریدیاها در آینده نزدیک می باشد.